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      前花青素的測定方法

      發布時間:2015-03-16瀏覽:1104次
       前花青素是用水從法國沿海松樹皮中提取出來的,并經過干燥的提取物的主要成分。

      鑒定: 
      1. 顏色反應:反應后顏色為深紅色。將50mg的樣品溶于1ml濃鹽酸和4ml乙醇的混合溶液中,然后加熱,直到混合溶液的顏色變為深紅色為止。 
      2. 薄層色譜法:吸附劑:硅膠60F251展開劑:乙酸乙酯:甲酸:水=18:1:1(體積比)顯色:將磷酸和乙醇按(1:1)的體積比混合,再加入1%的香草醛,噴霧薄層板,加熱1分鐘,只出現前花青素的紅色斑點,繼續加熱15分鐘后,各種單體全部顯色。樣品:將樣品配成25mg/mg的甲醇溶液,取5μl點于薄層板上。薄層色譜柱和檢測器,所得到的信號-時間曲線,又稱色譜流出曲線(elution profile)>色譜圖譜 
      Rf 0.62 兒茶素 
      0.55 前花青素二聚體 
      0.41 前花青素二聚體 
      0.34 前花青素三聚體 
      0.26 前花青素四聚體 
      0-0.2 前花青素寡聚體前花青素含量(Porter 試驗)

      一、原理:前花青素是含有兒茶素和表兒茶素單元的分子,它氧化水解后能夠生成紅色的花青素離子。前花青素本身沒有顏色,但是經過用熱酸處理后,可以生成深紅色的花青素離子。Porter試驗能夠定量測定前花青素在水解過程中生成的花青素離子。

      二、方法:試劑:甲醇 正丁醇 鹽酸 NH4Fe(SO4)2·12H2O儀器:分光光度計。將10mg樣品溶于10ml甲醇中。取上述樣品溶液1ml,用甲醇稀釋至10ml為待測檢液。將正丁醇與38%的鹽酸按照95:5的體積比混合后,取出6ml;將NH4Fe(SO4)2·12H2O用濃度為2mol/L的鹽酸按照2%(W/V)的比例配制,取出0.2ml,連同前面的6ml一同加到1ml待測檢液中,在加蓋密封的玻璃容器中(離心管)用沸水浴加熱40分鐘。如果對加蓋的試管進行加熱有麻煩的話,可以在沸水浴加熱回流。加熱40分鐘后,立即用冰水冷卻試管。在加熱完畢后15分鐘,于546nm處測吸光度。前花青素所戰百分素= 
      0.01389-反應混合物中樣品的濃度 mg/ml。 
      0.366-A1%1cm在546nm處前花青素的吸光度。

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